Недавно обнаруженные так называемые адаптивные натуральные киллеры имеют определенное сходство с Т-клетками памяти CD8+. Обе эти клеточные субпопуляции проявляют черты высокодифференцированных цитотоксических лимфоцитов со специализированными функциями и играют важную роль как в противовирусном, так и противоопухолевом иммунном ответе. Одним из основным поверхностных маркеров адаптивных NK-клеток, ассоциированных с цитомегаловирусной инфекцией, служит активирующий рецептор NKG2C, распознающий молекулу главного комплекса гистосовместимости HLA-E. Этот же рецептор обнаруживается на фракции Т-лимфоцитов, которые нередко экспрессируют и другие рецепторы, характерные для NK-клеток. В то же время, несмотря на растущий интерес к клеткам, экспрессирующим NKG2C, по-прежнему недостает информации об условиях и механизмах развития данной субпопуляции и о роли цитомегаловирусной инфекции в ее формировании. Данный проект направлен на изучение фенотипических, пролиферативных и функциональных свойств субпопуляций цитотоксических лимфоцитов человека, экспрессирующих активирующий рецептор NKG2C. В поиске сходств и различий будут исследованы как высокодифференцированные, так и менее зрелые субпопуляции NK-клеток и CD8+ Т-лимфоцитов, возможно, представляющие собой предшественников клеток со свойствами иммунологической памяти. С помощью оригинальной стратегии реконструкции репертуара Т-клеточных рецепторов будет проанализирован клональный состав NKG2C+ Т-клеток, негативных по CD56, и так называемых NKT-подобных клеток с фенотипом CD3+CD56+, полученных от доноров с известным HCMV-статусом. Ранее таких исследований не проводилось. Методом РНК-секвенирования будет проанализирован транскриптом высоко- и мало-дифференцированных субпопуляций лимфоцитов NKG2C+. Во фракциях Т-клеток, экспрессирующих NKG2C, будет оценен HCMV-специфический ответ, а также проанализирована натуральная и антитело-зависимая клеточная цитотоксичность, что позволит сделать заключение о функциональной роли этих субпопуляций. Анализ фенотипа, функциональных возможностей, пролиферативного потенциала и колоссального репертуара во фракциях альфа-бета Т-клеток и NK-клеток у HCMV-негативных индивидов даст возможность оценить важность цитомегаловирусной инфекции для развития NKG2C-экспрессирующих пулов цитотоксических лимфоцитов. Одним из аспектов проекта будет поиск корреляционных зависимостей между развитием субпопуляции экспрессирующих CD56 Т-клеток и размером фракций NKG2C+ NK-клеток и Т-лимфоцитов, что может указать на взаимосвязь противовирусного ответа этих звеньев цитотоксических клеток врожденного и адаптивного иммунитета. В проекте будет исследованна роль генетических факторов, таких как наличие генов ингибирующих рецепторов NK-клеток KIR2DL1, KIR2DL2 и KIR2DL3, и аллелей HLA-C, в развитии NKG2C-экспрессирующих клеточных пулов. Практический аспект проекта связан с разработкой способа генерации адаптивных NK-клеток, обладающих хорошим иммунотерапевтическим потенциалом, из менее дифференцированных NKG2C-позитивных субпопуляций NK-клеток. Для этого планируются применять фидерные клетки, экспрессирующие HLA-E. Такие генномодифицированные клеточные линии на основе клеток К562 и K562-mbIL-21 планируется получить в проекте с помощью вирусной трансдукции. Успешное выполнение этой задачи позволит использовать полученные данные, при разработке методик получения, культивирования и клинического применения NK-клеток с чертами адаптивности в противоопухолевой иммунотерапии.