Лаборатория биологических испытаний

Отдел биологических испытаний

Руководитель: Дьяченко Игорь Александрович, к. б. н.
dyachenko@bibch.ru

www.bibc.psn.ru/

In vivo моделирование, доклинические испытания активности и безопасности фармакологических веществ, принципы GLP, SPF-животные, неклинические исследования, неклинические исследования в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики

Лаборатория биологических испытаний сегодня является самой титулованной в РФ в области неклинических исследований. С 2005 года она имеет аккредитацию Международной ассоциации по оценке и аккредитации работы с лабораторными животными (AAALAC International). В 2013 году Лаборатория получила официальное признание соответствия принципам надлежащей лабораторной практики (GLP) Словацкой национальной службой по аккредитации (SNAS), что позволяет декларировать, что результаты неклинических исследований, выполненных в ней, могут быть признаны в странах, входящих в Организацию экономического сотрудничества и развития (страны ЕС, США, Канада и др.). Кроме того, Лаборатория была первой лабораторией, которая получила признание соответствия принципам GLP Российским органом мониторинга – Федеральной службой по аккредитации, и благодаря этому в РФ была завершена работа по созданию Национальной системы GLP.

Сейчас Лаборатория совместно с МФТИ и НИИ медицинской приматологии организовала две географически удаленные площадки. Таким образом, образовался центр, который выполняет полный цикл неклинических исследований в соответствии с принципами GLP. Благодаря этому центру в России появилась возможность экспортировать как продукцию, которая была исследована в этом центре, так и услуги по проведению неклинических исследований для зарубежных заказчиков, а также участвовать в комплексных международных программах по изучению лекарственных средств, пестицидов, косметической продукции, ветеринарных препаратов, пищевых и кормовых добавок, химических веществ промышленного назначения.

Лаборатория биологических испытаний ФИБХ РАН выполняет неклинические исследования в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики!

Ф.И.О.ДолжностьКонтакты
Дьяченко Игорь Александрович, к. б. н.зав. лаб.dyachenko@bibch.ru
Мурашев Аркадий Николаевич, д. б. н., профессорг.н.с.murashev@bibch.ru
Руденко Павел Анатольевич, д. вет. н.в.н.с.pavelrudenko@bibch.ru+7(4967)73-37-53
Бондаренко Дмитрий Александрович, к. фарм. н.с.н.с.bondarenko@bibch.ru
Казаков Виталий Анатольевич, д. м. н.с.н.с.vitalij.tomsk@list.ru
Музафаров Евгений Назибович, д. с.н.с.
Новикова Надежда Ивановна, к. б. н.с.н.с.novikova@bibch.ru
Ржевский Дмитрий Иванович, к. б. н.с.н.с.rjevski@bibch.ru
Слащёва Гульсара Амангалиевна, к. б. н.с.н.с.slashcheva_ga@mail.ru
Сурин Алексей Константинович, к. ф.-м. н.с.н.с.alan@vega.protres.ru
Туховская Елена Александровна, к. фарм. н.с.н.с.tukhovskaya@bibch.ru
Хохлова Оксана Николаевна, к. б. н.с.н.с.khohlova@bibch.ru
Шайхутдинова Эльвира Рауильевна, к. б. н.с.н.с.shaykhutdinova@bibch.ru
Жармухамедова Татьяна Юрьевна, к. б. н.н.с.tazharm@bibch.ru
Кравченко Ирина Николаевна, к. б. н.н.с.ikravchenko@bibch.ru
Паликов Виктор Анатольевичн.с.vpalikov@bibch.ru
Паликова Юлия Александровнан.с.yuliyapalikova@bibch.ru
Семушина Светлана Геннадиевнан.с.semushina@bibch.ru+7(4967)73-37-53
Туробов Валерий Игоревичн.с.vtur@bibch.ru
Исмаилова Алина Магомедовнам.н.с.ismailowa.a.m@yandex.ru
Калабина Елена Андреевнам.н.с.kalabina73@yandex.ru
Пахомова Ирина Анатольевнам.н.с.pakhomova@bibch.ru
Рассказова Екатерина Александровнам.н.с.katyarass@mail.ru
Руденко Виктория Борисовнам.н.с.viktoria.rudencko2014@gmail.com
Рыков Владимир м.н.с.vladimirrykov@bibch.ru
Садовникова Елена Станиславовнам.н.с.elenasadovnikova@yandex.ru
Салмова Маргарита Александровнам.н.с.

Ранее здесь работали:

Цубин А Сн.с.
Владимиров Василий Игоревичм.н.с.vladimirov@bibch.ru
Перепеченова Наталья Александровнам.н.с.
Бороздина Наталья Андреевнаинж.-иссл.borozdina@bibch.ru
Лобанов Александр Владимировичинж.-иссл.
Пономарева Татьяна Ивановнаст. лаб.ponomareva_t@rambler.ru

Все публикации (показать избранные)

Загружаются...

Дьяченко Игорь Александрович

Разработаны новые анальгетические препараты, пригодные для перорального использования

Совместно с: Лаборатория моделирования биомолекулярных систем,  Лаборатория химии метаболических путей,  Лаборатория нейрорецепторов и нейрорегуляторов

Среди кислоточувствительных ионных каналов (ASIC) субъединицы ASIC1a и ASIC3 являются наиболее привлекательными фармакологическими мишенями. Ингибирование этих каналов специфичными лигандами -  прямой путь к лечению социально значимых заболеваний, таких как хроническая и патологическая боль, инсульт, балезнь Паркинсона. Растительный лигнан Севанол,  выделенный ранее из темьяна, ингибирует активность изоформ ASIC1a и ASIC3 и оказывает значительное обезболивающее и противовоспалительное действие. Однако, его синтез сложен и содержит много стадий. Проведенные структурно-функциональные исследования позволили минимизировать структуру Севанола с сохранением как анальгетической активности на животных моделях, так и ингибирующее действие на ASIC. На структурном уровне было предсказано наличие сайта связывания Севанола в центральном вестибюле ASIC1a и показана его конкуренция за этот участок связывания с FRRF-амидным пептидом. Разработанные аналоги Севанола оказывали значительное обезболивающее и противовоспалительное действие при различных способах введения - внутривенное или внутримышечное (парентеральные способы), а также интраназальное или пероральное (неинвазивные способы). Разработанные методики синтеза аналогов позволяют уже сегодня начать внедрение этих потенциальных лекарственных средств в практические исследования, так как отсутствие выявленных побочных действий на данный момент и способ действия через желудочно-кишечный тракт являются важными конкурентными преимуществами новых молекул над существующими анальгетическими препаратами. Работа опубликована в журнале Pharmaceuticals (Basel).

Авторы: Осмаков Д.И, Владимиров А.А., Кошелев С.Г, Андреев Я.А., Козлов С.А. – лаборатория нейрорецепторов и нейрорегуляторов ИБХ РАН, Белозерова О.А., Кульбитский В.С.- лаборатория химии метаболических путей ИБХ РАН, Чугунов А.О., Ефремов Р.Г. - лаборатории моделирования биомолекулярных систем ИБХ РАН, Паликов В.А., Паликова Ю.А., Шайхутдинова Э.Р., Дьяченко И.А. - лаборатория биологических испытаний ФИБХ РАН, Гвозль А.Н. - ФГБУН "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства"

Впервые трех-петельные нейротоксины и новые аналоги брадикинин-петенцирующих пептидов обнаружены в яде гадюк с использованием транскриптомики и количественной протеомики

Совместно с: Лаборатория лиганд-рецепторных взаимодействий,  Лаборатория молекулярной токсинологии

Из яда гадюки Azemiops feae ранее нами был выделен аземиопсин, новый нейротоксин, ингибирующий никотиновый рецептор ацетилхолина. Для характеристики других токсинов A. feae был использован метод количественной протеомики, который выявил 120 уникальных белков. Всего были идентифицированы токсины, представляющие 14 семейств, среди которых брадикинин-потенцирующие пептиды с уникальными аминокислотными последовательностями обладали биологической активностью in vivo. Протеомный анализ выявил также необычные трех-петельные токсины, относящиеся к группе токсинов, обладающих нейротоксичностью. Это первое указание на присутствие трех-петельных нейротоксинов в ядах гадюк. Параллельно с этим транскриптомный анализ ядовитой железы, проведенный методом высокопроизводительного секвенирования (NGS), дополнительно выявил 206 предполагаемых транскриптов яда. Комбинированное исследование позволило охарактеризовать протеом яда и транскиптом ядовитой железы A. feae, которые в целом напоминают таковые у других змей из семейства Viperidae. Однако были открыты новые токсины, ранее не обнаруженные в ядах гадюк, в том числе трех-петельные нейротоксины и необычные брадикинин-потенцирующие пептиды.

Дизайн и синтез пептида с антибактериальной активностью

Совместно с: Группа химии пептидов

С целью создания нового класса соединений пептидной природы с антибактериальными свойствами предложен химический синтез конъюгатов состоящих из двух функционально-активных пептидов. Один пептид является амилоидогенным фрагментом цитозольного белка бактирии и его функция заключается в индукции агрегации «родительского» цитозольного белка. Второй пептид имеет свойство транслоцироваться через биологические мембраны, кроме того он служит переносчиком различных молекул через них. Таким образом, возможный биологический эффект конъюгата на молекулярном уровне заключался бы в индукции агрегации цитозольного белка внутри бактерии и нарушению его функционирования с фатальным эффектом для микроорганизма. Описаный подход экспериментально проверен в ходе изучения биологической активности конъюгатов состоящих из амилоидогенных пептидов, являющихся фрагментами белка S1 бактерии Thermus thermophilus и интернализирующего пептида RKKRRQRRR являющегося фрагментом белка Tat (Tat49-57). Один из конъюгатов обладал антибактериальной активностью сравнимой с антибиотиком канамицином по величине MIC. Предварительные данные по изучению механизма действия конъюгата свидетельствуют о том, что его взаимодействие с бактерией более сложное, чем предполагает исходная гипотеза, но эти данные не исключают наличия цитозольной мишени.

Публикации

  1. Kurpe SR, Grishin SY, Surin AK, Selivanova OM, Fadeev RS, Dzhus YF, Gorbunova EY, Mustaeva LG, Azev VN, Galzitskaya OV (2020). Antimicrobial and amyloidogenic activity of peptides synthesized on the basis of the ribosomal S1 protein from thermus thermophilus. Int J Mol Sci 21 (17), 1–19

Европейское химическое агенство признало результаты неклинических исследований проведенных в Испытательном центре

На базе отдела биологических испытаний создан Испытательный центр, который выполняет неклинические исследования в соответствии с Принципами надлежащей лабораторной практики (GLP) и руководствами Организации экономического сотрудничества и развития (OECD). Результаты неклинических исследований, выполненных в этом центре размещены на сайте  Европейского Химического Агенства, что указывает на то, что он отвечают критериям международной  системы взаимного признания результатов  неклинических исследований (OECD Mutual Acceptannce of Data (MAD) system).

Изучено физиологическое действие двух бисбензилизохинолиновых алкалоидов - лигандов каналов ASIC1a.

Совместно с: Лаборатория биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов,  Лаборатория нейрорецепторов и нейрорегуляторов

Подтип ASIC1a является самым эффективным кислото-чувствительным каналом в клеточной мембране, и он играет важную роль в возбуждении нейронов центральной нервной системе. Именно лиганды к этому подтипу каналов ASIC представляют наибольший интерес для разработки средств борьбы с болью, инсультами, и с нейродегенеративными заболеваниями.

В экспериментах in vitro на гетерологически экспрессированных каналах ASIC1a методом двухэлектродного фиксирования потенциала изучено действие двух бисбензилизохинолиновых алкалоидов растений.

Алкалоид линдольдхамин, выделенный из листьев лавра, значительно ингибировал ответ канала ASIC1a на физиологически значимые слабые стимулы pH 6,5–6,85 с IC50 в диапазоне 150–9 мкМ, но вызывал лишь частичный ингибирующий ответ при подаче более кислых раздражители. У мышей внутривенное введение линдольдхамина в дозе 1 мг/кг вызывало обезболивающий эффект в тесте термической гиперальгезии при воспалении, но не в тесте уксусные корчи, где проводят внутрибрюшинную инъекцию уксусной кислоты. Таким образом, было показана не просто перспективность использования растительных алкалоидов для облегчения боли, но и косвенно подтверждена вовлеченность каналов ASIC1a периферической нервной системы в генерацию болевого ответа на слабое закисление.

Структурный аналог дауризолин, в отличие от линдольдхамина, не ингибировал активацию канала ASIC1a, но вызывал необычный ответ на активацию канала протонами. Необычность заключается в проявлении второй компоненты тока, которая проявляется с задержкой в 2.5 секунды после начала развития первой быстрой компоненты тока и так же быстро десенситизируется. Вторые компоненты тока характерны для каналов ASIC2 и ASIC3, но эти компоненты постоянные, и длятся все время до полной отмены кислотного стимула. Найденный второй компонент тока у подтипа ASIC1a позволяет утверждать, что все типы кислото-чувствительных каналов имеют двойной механизм открывания и десенситизации тока, который интересно будет определить в дальнейших экспериментах.

Разработка эффективных твердофазных методов получения пептидов обладающих иммуносупрессорной активностью

Совместно с: Лаборатория фармакокинетики,  Группа химии пептидов

Проведено изучение эффективности различных методов получения пептидов, физиологичеки-активных в модели экспериментального автоимунного энцефаломиелита. Для поиска эффективных методов получения целевых пептидов опробованы различные варианты твердофазных методологий синтеза. С точки зрения химического выхода показана большая эффективность Fmoc/tBu методологии, не в последнюю очередь из-за возможности использования более широко круга активированных производных для преодоления медленной стадии реакций конденсации. Охорактеризованы некоторые побочные продукты, в частности, продукты удвоения аминоксилот, накопление которых в ходе химического синтеза осложняет очистку целевых продуктов методом ВЭЖХ. Разработанные методы позволили получить целевые продукты для проведения биологических испытаний.

Разработка лекарственных средств пептидной природы для лечения рассеянного склероза

Совместно с: Лаборатория белков гормональной регуляции,  Группа химии пептидов,  Лаборатория фармакокинетики

Рассеянный склероз – хроническое аутоиммунное заболевание  с неврологической патологией. Доминирующая роль иммунологических процессов в развитии болезни диктует необходимость лекарственные средства, позволяющих специфически минимизировать активность иммунных процессов. Обнаружено, что пептиды  A8AMS и mA8AMS, гомологичные фрагменту домена IgG VH человека, проявляют активность in vitro и in vivo, эффективно уменьшая симптомы развития экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, животной модели рассеянного склероза. Полученные результаты открывают новые возможности для разработки лекарственных средств пептидной природы для лечения рассеянного склероза.
1.    Туробов В.И., Данилкович А. В. Шевелев А. В., Бирюкова Ю. К.,  Азев В. Н., Мурашев А. Н., Липкин В. М., Удовиченко И. П. Пептид из состава тяжелой цепи иммуноглобулина человека, пригодный для лечения рассеянного склероза. 2016. Заявка на патент РФ №2016151603
2.     Туробов В.И., Данилкович А.В., Шевелев А.Б., Бирюкова Ю.К., Позднякова Н.В., Мустаева Л.Г., Горбунова Е.Ю., Байдакова Л.К., Полякова А.И., Азев В.Н., Мурашев А.Н.,  Липкин В.М., Удовиченко И.П. АКТГ-подобный пептид с иммуносупресорной функцией. 2017. Заявка на патент РФ №2017140866