Пресс-центр / новости / Наука /
Информация о ходе выполнения проекта Минобрнауки России по Соглашению о предоставлении субсидии № 14.607.21.0156
Информация о ходе выполнения проекта Минобрнауки России по Соглашению о предоставлении субсидии № 14.607.21.0156 от 3 октября 2016 г. по теме « Создание высокоаффинных Т-клеточных рецепторов на основе одноцепочечных антител для нацеленной иммунотерапии злокачественных новообразований»
За отчетный период 3-го этапа в рамках выполнения соглашения были проведены следующие работы:
1. Осуществлена кодон-оптимизация и синтез последовательностей ранее идентифицированных антигенов для экспрессии в эукариотической клеточной линии-продуценте
2. Произведена экспрессия антигенов в клетках млекопитающих и последующая очистка рекомбинантного белка для постановки селекции VHH- фрагментов антител
3. Методом рибосомного дисплея проведена in vitro селекция и обогащение библиотек наиболее аффинными фрагментами VHH-антител с антигенами, идентифицированными в результате глубокого секвенирования транскриптомов резекционного материала
4. Проведены раунды паннинга с контролем обогащения библиотек аффинными фрагментами с последующим секвенированием обогащенных пулов и отбором наиболее перспективных последовательностей VHH- фрагментов антител к новым антигенам.
5. Определена аффинность полученных фрагментов VHH- антител методом поверхностного плазмонного резонанса
6. Отобранные VHH-фрагменты экспрессированы в виде растворимых фрагментов, слитых с эпитопом Myc, очищены и протестированы на связывание с целевыми антигенами.
7. Полученные фрагменты антител протестированы на специфичность связывания с антигенами в составе CAR на клеточных линиях рака молочной железы и первичных культурах.
8. Получены экспериментальные образцы высокоаффинных Т-клеточных рецепторов на основе одноцепочечных антител.
9. Протестированы CAR в Т-лимфоцитах in vivo на мышиной модели с привитыми опухолями, полученными из клеток линий РМЖ или первичных культур
10. Оценена эффективность полученных CAR-экспрессирующих Т- лимфоцитов в качестве носителей для доставки онколитических вирусов к опухолям на мышиной модели in vivo
11. Разработан Лабораторный регламент быстрого получения высокоселективного химерного рецептора против антигенов, присутствующих на опухолевых клетках пациента.
12. Произведена оценка полноты решения задачи и достижения поставленных целей ПНИЭР.
13. Проведены дополнительные патентные исследования
14. Разработан проект технического задания на проведение ОТР по теме: «Проведение доклинических исследований высокоаффинных Т-клеточных рецепторов на основе одноцепочечных антител».
Все задачи третьего этапа работ выполнены в установленные сроки в соответствии с планом-графиком исполнения обязательств и условиями технического задания Соглашения о предоставлении субсидии № 14.607.21.0156 от 03.10.2016 г.
21 декабря 2018 года