Пресс-центр / новости / Отчеты /

Информация о ходе выполнения проекта по теме: «Разработка люминесцентных репортеров салициловой кислоты для сельского хозяйства»

В отчетный период (21.08.2025 – 31.12.2025) в рамках выполнения соглашения № 075-15-2025-663 (внутренний номер 13.2251.21.0313) о предоставлении субсидии от 21.08.2025 г. по теме: «Разработка люминесцентных репортеров салициловой кислоты для сельского хозяйства» были поставлены следующие задачи:

Задачи научной группы России:

1. Отбор чувствительных к активности салициловой кислоты промоторов. 

2. Сборка генетических конструкций.

3. Валидация конструкций в клетках растений.

4. Проведение патентных исследований и оформление заявки на патент.

Задачи научной группы Казахстана:

5. Отбор ряда фитогормонов, их аналогов или предшественников для исследования репортеров салициловой кислоты.

6. Подбор эффективных концентраций фитогормонов, их аналогов или предшественников для проведения тестирования активности репортеров.

7. Исследование специфичности репортеров салициловой кислоты с использованием ряда фитогормонов, их аналогов и предшественников, путем регистрации люминесценции.

8. Тестирование активности репортеров салициловой кислоты путем обработки клеток растений, экспрессирующих репортер салициловой кислоты и регистрации люминесценции.

В результате были получены следующие основные результаты:

1. В рамках данного раздела был проведен анализ научной литературы, по результатам которого отобрано минимум 5 промоторов, чувствительных к салициловой кислоте: pWRKY70, pPR1, pEDS1, pPAD4 и pSAG101. Эти промоторы регулируют гены ключевых элементов иммунного ответа растений (SAR) и отражают активность различных регуляторных узлов – от ранних EDS1-зависимых модулей до поздних NPR1-зависимых эффекторов, что обеспечивает возможность дифференцированного анализа SA-сигналинга.
2. Для создания сенсоров салициловой кислоты были разработаны и собраны шесть генетических конструкций, несущих ген люциферазы (nnLuz) биолюминесцентной системы грибов под контролем отобранных SA-чувствительных промоторов, а также конститутивного промотора p35S в качестве контроля. Сборка проводилась с использованием технологии модульного клонирования Golden Gate, что позволило получить плазмиды, пригодные для трансформации растений.
3. Собранные генетические конструкции были валидированы в культуре клеток Nicotiana tabacum BY-2, в результате чего был подтвержден статистически значимый индукционный эффект от обработки салициловой кислотой для репортеров pEDS1::nnLuz и pPAD4::nnLuz. Для конструкции pWRKY70::nnLuz была отмечена высокая базальная активность, превышающая сигнал конститутивного промотора p35S.
4. В рамках данного этапа проекта были успешно проведены патентные исследования, охватывающие созданные SA-чувствительные репортерные генетические конструкции, а результаты этих исследований были использованы для подготовки и оформления заявки на патент.
5. Были отобраны фитогормоны, их аналоги или предшественники (помимо самой салициловой кислоты) для проведения анализа специфичности стабильно экспрессируемого репортера салициловой кислоты pWRKY70::nnLuz.
6. Был проведен подбор оптимальных концентраций для каждого из выбранных фитогормонов, их аналогов и предшественников. Это позволило определить рабочие диапазоны дозировок, необходимые для дальнейшего тестирования активности SA-репортера и обеспечения корректности сравнительного анализа его специфичности.
7. Проведено исследование специфичности репортера салициловой кислоты путем регистрации люминесцентного сигнала в ответ на обработку выбранным рядом фитогормонов, их аналогов и предшественников.
8. Была проведена характеризация кинетики люминесцентного сигнала репортера салициловой кислоты в ответ на обработку SA и ее аналогами. Показан различный характер развития люминесценции в зависимости от используемого вещества.

Таким образом, все задачи проекта были выполнены в установленные сроки в соответствии с планом-графиком исследований Соглашения № 075-15-2025-663 (внутренний номер 13.2251.21.0313) о предоставлении субсидии от 21.08.2025 г.

13 января

<form action="" method="post" class="commentForm" id="commentForm-{0}"> <input type="hidden" name="pressId" value="5438" /> <input type="hidden" name="parentId" value="{1}" /> <input type="hidden" name="id" value="{2}" /> <txt name="comment_text" id="comment_text">{3}</txt> <input type="button" class="button" value="Комментировать" /> <a class="button" href="javascript:void(null)">Отмена</a> <span class="wait">Подождите немного...</span> <div class="clear"></div> </form>