Int J Mol Sci, 2026, 27(16):7438

Evaluation of Site-Specific Radioiodination of Anti-EGFR-Targeted DARPin E01 Using (4-Hydroxyphenyl)ethyl Maleimide

Non-invasive radionuclide molecular imaging of epidermal growth factor receptor (EGFR) expression can guide patient stratification for EGFR-targeted therapies. The designed ankyrin repeat protein (DARPin) E01, which binds EGFR ectodomain III with sub-nanomolar affinity, is a promising scaffold for single-photon emission computed tomography (SPECT) imaging probes. In the present study, we compared site-specific radioiodination of DARPin E01 using the bifunctional prosthetic group (4-hydroxyphenyl)ethyl maleimide (HPEM) with site-unspecific radioiodination via [I]I-para-iodobenzoate (PIB). [I]I-HPEM was conjugated to the C-terminus of DARPin E01 via Glu-Glu-Glu-Cys ([I]I-E01-EC-HPEM) or Gly-Gly-Gly-Cys ([I]I-E01-GC-HPEM) linkers. Radiolabelling yields were 6 ± 2% and 13 ± 5%, respectively. Size-exclusion purification provided radiochemical purity 98%. Both HPEM conjugates retained nanomolar EGFR-binding affinity (K: 3.2 ± 0.6 and 4.8 ± 0.9 nM) and demonstrated EGFR-specific tumour accumulation in A-431 xenografts. Cellular processing was characterised by rapid binding, slow internalisation, and non-residualising behaviour of all variants. Kidney uptake was lower for the site-specifically labelled variants. However, site-specific labelling evidently elevated hepatobiliary excretion and uptake in Na/I-symporter-expressing organs compared to [I]I-(HE)-E01-PIB, while linker composition (EC vs. GC) did not significantly alter biodistribution. Site-unspecific radioiodination with [I]I-PIB remains the preferred approach for clinical SPECT imaging of EGFR expression with DARPin E01.

Larkina M, Yanovich G, Hasnowo LA, Varvashenya R, Eskova D, Sharychev I, Prach A, Plotnikov E, Zelchan R, Schulga A, Konovalova E, Ziganshin RH, Belousov M, Tolmachev V, Deyev SM

Отдел иммунологии, Лаборатория молекулярной иммунологии, Группа масс-спектрометрии

: 10.3390/ijms27167438
Scopus: 2-s2.0-105048433674
: 42653439
IBCH: 12716
Ссылка на статью в журнале: https://www.mdpi.com/1422-0067/27/16/7438
Нет данных о цитировании
Данные статьи проверены модераторами 2026-10-11

Список научных проектов, где отмечена публикация

  1. Онкотераностика и проблемы резистентности к противоопухолевым и антибактериальным препаратам (23 Апреля 2024 года — 31 Декабря 2026 года). Деев С.М., Алексеева Н.А., Алексеева Л.Г., Алипер Е.Т., Алферова В.А., Андрианова А.Г., Бабкова Ю.С., Баранова А.А., Баранова М.Н., Белогуров А.А., Богачук А.П., Бочаров Э.В., Буренина О.Ю., Бычков М.Л., Веретененко И.И., Волков Д.В., Габибов А.Г., Гордеева В.Д., Горелик Л.В., Грязнова О.Ю., Гуляк Е.Л., Дерябин А.С., Доброчаева К.Л., Евпак А.С., Егорова Н.С., Емельянов Е.А., Ермолаева Е.О., Ефремов Р.Г., Житлов М.Ю., Жучков В.А., Захарова М.Ю., Звягин А.В., Зелепукин И.В., Зинченко А.А., Калганова А.И., Кириченко А.В., Кирпичников М.П., Кнорре В.Д., Ковалева Д.К., Коваленко Е.И., Кокаева И.С., Коновалова Е.В., Коншина А.Г., Короткова Н.А., Коршун В.А., Котельникова О.В., Котельникова П.А., Кравченко Т.В., Крылов Н.А., Кудряева А.А., Кузьмина О., Курбацкая И.Н., Лазарев И.В., Логвинов А.С., Люкманова Е.Н., Мазур Р.В., Маллаев Р.А., Соболева (Мирзоева) Н.З., Миркасымов А.Б., Мусатова О.Е., Нечаева А.М., Никитин Т.Д., Никонова А.В., Нольде Д.Е., Оджомоко Л.О., Орлова Д.А., Панина И.С., Пахомов А.А., Пахомова Т.Е., Пижонков Н.А., Пипия С.О., Полянский А.А., Похоруков Д.А., Прокопенко Ю.А., Прошкина Г.М., Родионов В.И., Ротанова Т.В., Рубцов Ю.П., Рябуха Я.А., Саватеева Н.С., Сапожникова К.А., Серова Е.В., Синичич А.А., Смирнов И.В., Согомонян А.С., Спаллоне А., Степанова (Украинская) В.М., Стрельцова М.А., Сутугин Ю.А., Терехов С.С., Фролова А.Ю., Хаврошечкина Е.В., Ходарович Ю.М., Холоденко Р.В., Цетлин В.И., Чумаков С.П., Шилова П.А., Шлепова О.В., Шрамова Е.И., Шульга А.А.. Грант, Бюджетное финансирование.