Разработка способов получения аналогов тимозин-бета 4 в виде коньюгатов, устойчивых к деградации в токе крови
В работе представлен способ получения моноконъюгатов рекомбинантного тимозин-бета 4 (Т|34) человека с капроновой кислотой, полисиаловой кислотой и полиэтиленгликолем (ПЭГ). Реакцию ацилирования проводили с использованием ангидрида гексановой кислоты, сиалирования - бутиральдегидного производного полисиаловой кислоты (14 кДа) и ПЭГилирования - пропиональдегидного производного ПЭГ (10 кДа). В результате многофакторных экспериментов были определены компоненты реакционной смеси и оптимизированы условия проведения данных реакций. Для каждого из аналогов разработана схема одностадийной очистки с помощью ОФ-ВЭЖХ; степень чистоты при этом составила не менее 98%. Результаты пептидного картирования в совокупности с хромато-масс-спектрометрическим и электрофоретическим методами анализа показали, что полученные аналоги тимозин-бета 4 являются моноконъюгатами, в которых исходный пептид модифицирован по N-концевому серину. Полученные аналоги обладают повышенной устойчивостью к деградации в плазме крови по сравнению с немодифицированным тимозином-бета 4 и рассматриваются как перспективные кандидаты для дальнейших биологических испытаний.