Значительным преимуществом иммунотерапевтического применения NK-клеток является их слабая, по сравнению с Т-клетками, способность вызывать реакцию «трансплантат против хозяина», что позволяет использовать для адоптивного переноса в организм больного не только аутологичные, но и аллогенные NK-клетки. В настоящее время подходы к адоптивной иммунотерапии опухолевых заболеваний с использованием NK-клеток во всем мире находятся в стадии активной разработки, в процессе которой необходимо преодолеть два препятствия: 1) не все NK-клетки одинаково эффективно способны уничтожать опухолевые клетки (это связано с репертуаром активирующих и ингибирующих рецепторов, которые они экспрессируют); 2) большой проблемой является то, что NK-клетки имеют короткий срок жизни, и их сложно нарастить в культуре. Целью нашего проекта является разработка методов получения большого количества NK-клеток с высокой противоопухолевой активностью. Для увеличения активности этих эффекторов будет применяться стимуляция цитокинами (IL-2, IL-21 и др.). Будет проведена генно-инженерная модификация человеческих NK-клеток, способствующая их наращиванию в культуре, неограниченному лимитом Хейфлика, который связан с активностью теломеразы. Для решения поставленной задачи планируется выполнить внедрение гена теломеразы в NK-клетки человека путем их трансдукции с помощью рекомбинантных вирусных частиц. Такие частицы будет получены с использованием систем ретровирусных и лентивирусных векторов, позволяющих безопасно (модифицированные клетки будут неспособны продуцировать вирусные частицы) вставить в клеточный геном выбранный ген. Генетическая модификация NK-клеток, к настоящему времени успешно выполненная лишь в нескольких мировых лабораториях, формирует новое направление в разработке потенциальных препаратов для клеточной иммунотерапии. С помощью разработанного в данном проекте подхода планируется провести трансдукцию клонов NK-клеток человека, полученных с помощью клеток K562, экспрессирующих мембраносвязанный IL-21, и отобранных по фенотипическим и функциональным характеристикам таким образом, чтобы высокая экспрессия активирующих рецепторов сочеталась с несовпадением специфичности их ингибирующих рецепторов семейства KIR с HLA-генотипом рецепиента. Данный подход может быть в будущем использован для последующего генетического редактирования репертуара активирующих и ингибирующих рецепторов NK-клеток в целях их дальнейшей оптимизации для противоопухолевой иммунотерапии.