В настоящее время накопилось большое число свидетельств о том, что многие разновидности опухолевых клеток, в отличие от их нетрансформированных предшественников характеризуются транслокацией внутриклеточных БТШ70 на поверхность плазматической мембраны. Это позволило отнести БТШ70, экспонированные на клеточной поверхности, к опухоль-ассоциированным антигенам и явилось основанием для поиска возможностей практического использования данного феномена в клинической онкологии. Существенным аргументом в пользу перспективности таких исследований послужила обнаруженная способность БТШ70, представленных на поверхности клеток-мишеней, усиливать цитотоксическую активность NK-клеток. В связи с этим, работы многих исследовательских групп посвящены разработке подходов к повышению уровня мембрано-ассоциированных БТШ70 в опухолевых тканях. В то же время, учитывая естественное присутствие таких протеинов на поверхности широкого спектра типов опухолевых клеток, в качестве одного из перспективных подходов можно рассматривать применение для противоопухолевой терапии моноклональных антител, взаимодействующих с молекулами БТШ70. Хорошо известно, что препараты антител, селективно взаимодействующих с маркерами раковых клеток, могут успешно применяться для таргетной противоопухолевой иммунотерапии. В связи с этим, тематика данного проекта, направленная на поиск возможностей использования новых моноклональных антител для противоопухолевой иммунотерапии, обладает несомненной актуальностью. Ранее нами была получена панель из шести В-клеточных гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к различным эпитопам молекулы БТШ70. Существенно, что три разновидности антител из этой панели направлены к сайтам связывания на С-концевом домене молекулы БТШ70 (2E4, 4F11, 2F3), а вторая тройка моноклонов (6G2, 2E5, 3C5) – к эпитопам на N-концевом домене БТШ70. Предварительные исследования показали, что два из трех N-специфичных антител (6G2 и 3С5) распознают БТШ70, представленных на поверхности ряда линий опухолевых клеток, значительно эффективнее всех других протестированных нами антител к этому протеину. Кроме того, в наших предварительных экспериментах было показано, что антитела 6G2 и 3С5 индуцировали наибольший уровень комплемент- и антитело-зависимого киллинга опухолевых клеток в моделях in vitro. Полученные данные говорили в пользу преимущественного С-терминального взаимодействия молекулы БТШ70 с плазматической мембраной опухолевых клеток, приводящее к ориентации во внешнее пространство N-терминальной части данной молекулы. В отличие от этого, из опубликованных в литературе сведений следует, что за стимуляцию цитотоксической и пролиферативной активности NK-клеток отвечает С-концевой домен БТШ70, экспонированных на поверхности опухолевых клеток. Указанное противоречие можно объяснить возможностью разнообразной ориентации молекул БТШ70, транслоцированных на клеточную поверхность, с профилями, различающимися у конкретных разновидностей клеток злокачественных новообразований. Анализ различий в ориентации мембрано-ассоциированных БТШ70 будет проведен в рамках данного проекта с использованием описанной панели моноклональных антител для целого ряда линий опухолевых клеток человека и мыши. В предлагаемом проекте запланирован также большой раздел исследований, направленных на расширенный сравнительный анализ противоопухолевой эффективности использования приведенных разновидностей анти-БТШ70 антител в моделях in vitro и in vivo. Тем самым будут протестированы возможные подходы к разработке и использованию препаратов на основе анти-БТШ70 моноклональных антител для противоопухолевой иммунотерапии. Указанные исследования будут проведены впервые, что свидетельствует о научной новизне данного проекта.