Одним из действенных подходов к изучению функционирования калиевых потенциал зависимых Kv1-каналов, их участия в различных клеточных процессах в норме и патологии, разработке эффективных способов терапевтического воздействия на активность каналов при развитии ряда социально-значимых заболеваний является применение пептидных блокаторов как наиболее аффинных и высокоселективных ингибиторов активности Kv1-каналов. В этом направлении актуально совершенствование высокотехнологичных методов изучения взаимодействия Kv1-каналов с блокаторами, основанных на их экспрессии в животных клетках в виде панели близкородственных каналов. Использование в аналитических системах гомотетрамерных, а также гетеротетрамерных форм каналов, сосуществующих в животных клетках, позволяет более точно оценивать эффективность пептидных блокаторов в отношении каналов-мишеней, что имеет перспективное фармакологическое значение. Целью проекта является применение высокоинформативных флуоресцентных методов исследования в сочетании с современными методами биоинженерии для разработки новых методов анализа активности пептидных блокаторов по их связыванию с Kv1-каналами на эукариотических клетках в условиях, приближенных к in vivo, в том числе, измерения констант диссоциации образующихся комплексов. Поставленная задача будет решаться на основе клеток HEK293 с повышенным уровнем мембранной экспрессии флуоресцирующих гомотетрамерных каналов Kv1.1, Kv1.2 и Kv1.3, а также гетеротетрамерных каналов Kv1.1/Kv1.2. В проекте будут разработаны новые флуоресцентные пептидные блокаторы, обладающие высокой аффинностью к исследуемым Kv1- каналам. Эти блокаторы будут применяться для развития методов флуоресцентного имиджинга калиевых каналов, в том числе, для исследования клеточной локализации и подвижности комплексов каналов с блокаторами, имеющих функциональное значение. Будет проведена оценка аффинности различных пептидных блокаторов к гетеротетрамерным каналам с целью выявления наиболее активных блокаторов. Успешное решение задач проекта расширит возможности изучения активности пептидных блокаторов, развития флуоресцентных скрининговых технологий, методов имиджинга каналов на клеточном уровне, а также будет способствовать развитию методов терапии аутоиммунных, неврологических и онкологических заболеваний с применением пептидных блокаторов калиевых каналов.