Исследование влияния различных вирусных инфекций на иммунную систему человека является активно прогрессирующей областью биологии. Расширение представлений о том, как иммунная система реагирует на присутствие вирусов в организме человека может позволить сделать шаг на пути к созданию высокоэффективных терапевтических препаратов. Во многом, благодаря натуральным киллерам (NK-клеткам) иммунная система противостоит вирусным заболеваниям. В организме людей, столкнувшихся с инфекцией цитомегаловируса (HCMV), формируется пул так называемых адаптивных NK-клеток, которые обладают высокой продолжительностью жизни и более выраженным ответом при повторной встрече с этим патогеном. Свойства клеточной памяти NK-клеток могут оказаться полезными при разработке новых препаратов клеточной терапии опухолей. Поэтому особенно важно выявить как свойства NK-клеток, отвечающих на патогенный стимул, так и механизмы активации этих клеток. В данном проекте для активации и наращивания NK-клеток будут использованы аутологичные PBMC здоровых людей с предварительно удаленными из них CD3+ T-клетками (РBMC CD3-), обработанные пептидом VMAPRTLFL, происходящим из белка цитомегаловируса. Данный пептид способен встраиваться в молекулы HLA-E и презентироваться на поверхности клеток, где его способны распознавать NK-клетки, и в первую очередь он вызывает активацию и экспансию субпопуляции NK-клеток NKG2C+. Будут исследованы возможности стимуляции NK-клеток данным пептидом в отсутствие IL-2, что позволит изучить свойства NK-клеток, отвечающих на данный стимул, в отсутствие фоновой активации цитокинами. Будет исследован ответ на стимул как NK-клеток, полученных от HCMV-серопозитивных и HCMV-серонегативных доноров. Будут охарактеризованы пролиферативная активность, фенотип и функциональные свойства NK-клеток, ответивших на данный тип стимуляции. В том числе, будет измерена функциональная активность полученных клеток против опухолевых сфероидов, что позволит оценить потенциальную эффективность их применения в терапии солидных опухолей. Также планируется изучение возможных механизмов активации NK-клеток в ответ на пептид, в том числе роли сигнальных транскрипционных факторов STAT1 и STAT5. Несмотря на то, что не предполагается активация цитокинами извне, NK-клетки и РBMC CD3- сами способны к продукции цитокинов в ответ на стимуляцию пептидом VMAPRTLFL, которые могут как стимулировать пролиферацию и функциональную активность NK-клеток, так и подавлять ее. Поэтому в клеточных культурах дополнительно будет измерена продукция широкого спектра цитокинов. Исследования методов стимуляции NK-клеток без использования экзогенных цитокинов, помимо своей фундаментальной значимости, также актуальны для изучения возможностей влияния на свойства NK-клеток, оказавшихся в иммуносупрессивном контексте с явным дефицитом стимулирующих факторов (в том числе IL-2), например, в опухолевом микроокружении. Полученные в ходе реализации проекта данные будут актуальны для разработки новых и улучшения существующих методов применения NK-клеток в иммунной терапии опухолей. Важно отметить, что, согласно литературным данным, ранее наращивание NK-клеток с пептидом в отсутствие стимулирующих цитокинов (IL-2 и др.) не проводилось.