Пресс-центр / новости / Наука /
Информация о ходе выполнения фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами по Соглашению №14-14-01036 с Российским научным фондом по теме: «Биоинженерия новых антибиотиков на основе защитных пептид
В результате выполнения работ по Соглашению №14-14-01036 получены результаты: 1) Получение рекомбинантных аналогов (гетерологическая экспрессия, выделение и очистка)
Все аналоги ареницина-1 с точечными заменами в количестве 27, были получены с использованием единой схемы экспрессии и очистки, основанной на использовании РНК полимеразы бактериофага Т7 и промотора Т7 в клетках E.coli BL21(DE3), а также на получении гибридного белка, содержащего последовательность из восьми остатков гистидина и модифицированный тиоредоксин А.
2) Тестирование антимикробной активности ареницина-1 и его аналогов.
Для всех полученных рекомбинантных пептидов была протестирована антимикробная активность в отношении ряда условно-патогенных грамположительных (S. aureus) и грамотрицательных (E. coli, P. aeruginosa) бактерий и установлены значения минимальной ингибирующей (МИК) и минимальной бактерицидной (МБК) концентрации.
3) Определение минимальной гемолитической концентрации ареницина-1 и его аналогов.
Цитотоксическая активность пептидов определялась по способности вызывать лизис человеческих эритроцитов. Для всех полученных аналогов ареницина были определены значения минимальной гемолитической концентрации (МГК), вызывающие лизис 10% эритроцитов.
4) Определение значений терапевтического индекса для ареницина-1 и его аналогов
Оценка селективности действия всех полученных аналогов ареницина была проанализирована путем расчета соответствующих терапевтических индексов (ТИ) – отношения минимальной гемолитической концентрации (МГК) к среднему геометрическому значений минимальной ингибирующей концентрации (МИК) для трех бактериальных культур.
5) Тестирование совместного действия АМП с классическими антибиотиками
На данном этапе было исследовано совместное действие ареницина-1 и его наиболее активного в отношении бактерий аналога V10R с тремя классическими антибиотиками, которые в настоящее время находят применение в клинической практике, а также определены индексы долевых ингибирующих концентраций для шести пар соединений АМП-антибиотик.
6) Подготовка промежуточного отчёта о результатах НИР
Промежуточный отчет о результатах НИР был подготовлен в соответствии с установленной формой для отчетов о выполнении проекта и о целевом использовании средств гранта Российского научного фонда по приоритетному направлению деятельности Российского научного фонда «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами».
7) Подготовка научных публикаций
В рамках проекта были опубликованы 2 статьи в рецензируемых журналах, индексируемых в базе данных Web of Science:
1. П.В. Пантелеев, И.А. Болосов, С.В. Баландин, Т.В. Овчинникова. (2015) Строение и биологические функции β-шпилечных антимикробных пептидов. Acta Naturae, 7: 39-50.
2. Pavel V. Panteleev, Ilia A. Bolosov, and Tatiana V. Ovchinnikova (2015) Bioengineering and functional characterization of arenicin shortened analogs with enhanced antibacterial activity and cell selectivity. Journal of Peptide Science, doi:10.1002/psc.2843.
3 декабря 2015 года