Лаборатория структурной биологии ионных каналов

Лаборатория исследует мембранные рецепторы и ионные каналы, а также соединения, действующие на них (токсины, эндогенные лиганды). Для исследования структуры и механизмов действия на молекулярном уровне мы применяем современные методы структурной биологии: ЯМР-спектроскопию и криоэлектронную микроскопию. В настоящее время мы изучаем механизмы взаимодействия токсинов с потенциал-зависимыми K+ и Na+ каналами (Kv и Nav), а также исследуем структуры белковых лигандов никотинового ацетилхолинового рецептора (nAChR). Структурные исследования мембранных рецепторов и каналов необходимы для разработки новых средств диагностики и терапии заболеваний нервной, сердечно-сосудистой и мышечной систем организма. Кроме того, мы исследуем структуры и механизмы действия антибиотиков и защитных пептидов растений и животных. Эти исследования необходимы для создания новых препаратов для лечения инфекционных заболеваний.

Рис 1. Структура комплекса канала Nav1.4 из мышц человека с токсином Hm-3 из яда паука Heriaeus melloteei по данным ЯМР. (A) Комплекс Hm-3 (голубой/фиолетовый) с первым потенциал-чувствительным доменом (DI) канала (песчаный/красный). Вид сбоку, со стороны липидного бислоя. (В) Комплекс токсин-канал. Вид на плоскость мембраны со стороны внеклеточного пространства.

Нашей лабораторией проведены ЯМР-исследования структуры и динамики потенциал-чувствительных доменов нескольких K+ и Na+ каналов, включая канал Nav1.4 из мышц человека. Дисфункции канала Nav1.4 вызывают расстройства опорно-двигательного аппарата, такие как паралич, миастенический синдром и миотония. Впервые охарактеризованы «необычные» флуктуации в структуре доменов, идущие с характерными временами в диапазоне мкс-мс, возможно, являющиеся прообразом структурных перестроек, происходящих при потенциал-зависимой активации. Показано, что домены Na+ каналов обладают большей конформационной пластичностью по сравнению с доменами K+ каналов. Это свойство, вероятно, обуславливает более быстрое срабатывание Nav каналов при изменении трансмембранного потенциала. Нами исследованы токсины VSTx1 и Hm-3 из яда пауков, которые, связываясь с участком мембраны, окружающий ионный канал, блокируют потенциал-зависимую активацию. На основании экспериментальных данных ЯМР-спектроскопии, совместно с лабораторией молекулярных инструментов для нейробиологии ИБХ РАН построена модель комплекса токсина Hm-3 с каналом Nav1.4 из мышц человека. Полученные структурные данные открывают возможность дальнейших фармакологических разработок.

В настоящее время, совместно с биологическим факультетом МГУ, используя методы электронной микроскопии, мы исследуем пространственную структуру полноразмерного канала Kv7.1 сердечной мышцы человека. Дисфункции этого канала приводят к развитию наследственной аритмии – синдрома удлиненного интервала QT.

Совместно с группой биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов ИБХ РАН, используя методы ЯМР-спектроскопии, нами определены структуры нескольких «трехпетельных» белков, действующих на ионный канал никотинового ацетилхолинового рецептора (nAChR). Определены пространственные структуры токсина WTX из яда кобры, регуляторных белков Lynx1 и Lypd6 из нервной системы человека и белков SLURP-1 и SLURP-2, продуцируемых клетками эпителия человека. Эти молекулы имеют перспективы для разработки новых лекарств, нацеленных на лечение нейродегенеративных заболеваний.

ris2_trehpetelnye.png

Рис 2. Пространственные структуры трехпетельных белков, действующих на никотиновые ацетилхолиновые рецепторы, по данным ЯМР. WTX токсин из яда кобры Naja kaouthia. Lynx1 и Lypd6 – регуляторные белки нервной системы человека.

Используя методы ЯМР-спектроскопии, наша лаборатория совместно с Учебно-научным центром ИБХ РАН исследует структуру и механизм действия новых антибиотиков и защитных пептидов растений и животных. Большинство из изученных молекул демонстрируют повышенное сродство к мембранам бактериальных клеток и способны образовывать поры и ионные каналы, которые и приводят к гибели клетки-мишени. Нами были определены пространственные структуры и исследована динамика следующих молекул: двухкомпонентный лантибиотик лихеницидин, антибиотик антиамебин, антимикробный пептид ареницин из морского червя, антимикробный пептид аурелин из медузы, пептид дефенсин из чечевицы, липид-транспортирующий белок чечевицы в комплексе с липидами.

ris3_arenitsin_dimer.png

Рис 3. Пространственная структура и конформационная пластичность мономера антимикробного пептида ареницина в воде и димера пептида в мембраноподобном окружении. Справа показано образование ареницином тороидальных пор в мембране бактериальной клетки.

Также лаборатория разрабатывает новые подходы для изучения мембранных биомолекул. Одним из перспективных направлений является использование наночастиц на основе липопротеинов высокой плотности (нанодисков). Нами впервые была показана возможность применения нанодисков в качестве среды для ЯМР-исследований мембранных белков и мембраноактивных пептидов, исследована возможность применения нанодисков в бесклеточных системах синтеза для получения функционально-активных форм мембранных белков, а также возможность применения нанодисков для фолдинга мембранных белков in vitro.

Ris4_nanodiskibeskletka.png

Рис 4. Добавление предварительно сформированных нанодисков в трансляционную смесь бесклеточной системы синтеза позволяет получать функционально-активные мембранные белки, доступные для исследования методами ЯМР-спектроскопии.

Нашей лабораторией ведутся разработки новых подходов для установления химической структуры и изучения механизмов превращения в азот-богатых гетероциклических соединениях. Один из разработанных подходов основан на измерении и анализе «малых» (амплитуда от 1 до 0.01 Гц) констант спин-спинового взаимодействия 13С-15N и 1H-15N в соединениях, селективно меченных стабильным изотопом 15N. Применение этого подхода позволило изучить процессы азидо-тетразольной таутомерии в азидо-триазинах и азидо-пиримидинах.

ris5_himiya15N.png

Рис 5. Анализ «малых» констант спин-спинового взаимодействия 13С-15N в соединениях, меченных изотопом 15N, позволяет однозначно установить структуру тетразольной формы в азидо-триазинах и азидо-пиримидинах.

Лаборатория ведет работы в сотрудничестве с подразделениями ИБХ РАН:

Лаборатория сотрудничает с Российскими научными и образовательными организациями:

Международные партнеры:

Группа структурной биологии ионных каналов была организована в 2015 году в рамках программы Президиума РАН «Молекулярная и клеточная биология» (де факто группа существовала с 2008 года). В 2019 году группа получила статус лаборатории.

  1. Исследование структуры K+ и Na+ каналов человека и механизмов действия токсинов, влияющих на потенциал-зависимую активацию.
  2. Изучение взаимосвязи структура-функция в «трехпетельных» белках – лигандах никотинового ацетилхолинового рецептора.
  3. Исследование структуры и механизмов действия новых антибиотиков и защитных пептидов.
  4. Разработка новых мембраномоделирующих сред на основе липопротеинов высокой плотности (нанодиски) для продукции и структурно-функциональных исследований мембранных белков и пептидов.
  5. Разработка новых методов ЯМР для установления структуры и механизмов превращения азот-богатых гетероциклических соединений.
  • Исследована структура и динамика двух потенциал-чувствительных доменов канала Nav1.4 из мышц человека. Исследована структура и мембранная активность токсина Hm-3 из яда паука. На основании экспериментальных данных ЯМР-спектроскопии построена модель комплекса Nav1.4/Hm-3.
  • В потенциал-чувствительном домене канала KvAP археи охарактеризованы межспиральные движения в мкс-мс диапазоне, возможно, являющиеся прообразом структурных перестроек, происходящих при потенциал-зависимой активации.
  • Определены пространственные структуры и исследована внутримолекулярная динамика для ряда «трехпетельных» белков, действующих на никотиновые ацетилхолиновые рецепторы, включая токсин кобры WTX, регуляторные белки Lynx1 и Lypd6 из нервной системы человека и белки SLURP-1 и SLURP-2 из эпителия человека.
  • Определены пространственные структуры и предложен механизм действия для новых антибиотиков и защитных пептидов растений и животных, включая двухкомпонентный лантибиотик Лихеницидин; антибиотик антиамебин; антимикробные пептиды ареницин и аурелин, дефенсин и липид-транспортирующий белок чечевицы.
  • Разработан ряд новых подходов по применению нанодисков для продукции и структурно-функциональных исследований мембранных белков и пептидов.
  • Разработан новый метод ЯМР для установления химической структуры и изучения механизмов превращения в азот-богатых гетероциклических соединениях.

Все публикации (показать избранные)

Загружаются...

Шенкарёв Захар Олегович

Комбинаторное селективное введение изотопов 13C и 15N упрощает анализ спектров ЯМР и позволяет картировать интерфейс взаимодействия в комплексах мембранных рецепторов с лигандами

Совместно с: Группа анализа структуры мембранных белков in silico,  Лаборатория биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов,  Лаборатория молекулярных инструментов для нейробиологии

Комбинаторное введение в молекулы белков стабильных изотопов 13C и 15N позволяет значительно упростить анализ спектров ЯМР. Впервые решена задача и разработан алгоритм CombLabel по расчету схемы комбинаторного введения 13C и 15N меток с минимальной ценой. Применение программы позволило произвести отнесение 50% ЯМР-сигналов основной цепи второго потенциал-чувствительного домена натриевого канала Nav1.4 человека (VSD-II). Токи утечки через мутантные варианты Nav1.4, содержащие замену Arg675Gly в VSD-II, приводят к развитию наследственного заболевания – нормокалемического периодического паралича. Методом ЯМР спектроскопии определен интерфейс взаимодействия VSD-II с токсином Hm-3 из яда паука Heriaeus melloteei, который способен блокировать токи утечки. В модели комплекса VSD-II/Hm-3, построенной на основании данных ЯМР, токсин связывается с внеклеточной петлей S1-S2, дестабилизируя состояние домена, при котором наблюдаются токи утечки. На примере комплексов токсина Hm-3 с VSD-I и VSD-II канала Nav1.4 показано, что токсины паукообразных могут по-разному взаимодействовать с различными доменами в составе одного натриевого канала.

Трехпетельные белки человека ингибируют рост клеток карцином

Совместно с: Лаборатория биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов

Никотиновые рецепторы ацетилхолина (nAChR) играют важную роль в физиологии клеток эпителия, а их активация способствует развитию карцином. Природные модуляторы никотиновых рецепторов ацетилхолина могут стать перспективными прототипами новых противоопухолевых средств.

Показано, что рекомбинантные препараты трехпетельных белков человека ws-Lynx1 и rSLURP-1 ингибируют рост клеток карциномы легкого и меланомы. Препарат ws-Lynx1 в клетках А549 стимулирует антипролиферативные и проапоптотические сигнальные каскады, связанные с активацией α7-nAChR. Препарат rSLURP-1 тормозит никотин-индуцированный рост клеток карциномы легкого, а также отменяет вызванное никотином увеличение экспрессии α7-nAChR и снижение экспрессии гена-онкосупрессора PTEN. Кроме того, rSLURP-1 тормозит рост мультиклеточных сфероидов из клеток различных карцином. Совместное применение rSLURP-1 с другими противоопухолевыми препаратами (гефитиниб, бортезомиб, доксорубицин) приводит к полной остановке роста сфероидов.

Таким образом, препараты ws-Lynx1 и rSLURP-1 представляют собой перспективные прототипы для разработки новых препаратов для лечения онкологических заболеваний.

Взаимодействие вольт-сенсорного токсина Hm-3 с потенциал-чувствительным доменом Na+ канала Nav1.4: структурный взгляд на связывание опосредованное мембраной

Совместно с: Лаборатория биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов,  Лаборатория молекулярных инструментов для нейробиологии

Потенциалозависимые Na+ каналы (Nav) играют важнейшую роль в функционировании сердечно-сосудистой, мышечной и нервной систем. Некоторые мутации вызывают токи утечки через потенциал-чувствительные домены (VSD) каналов Nav, которые приводят к различным заболеваниям. Гипокалиемический периодический паралич (HypoPP) 2 типа вызван мутациями в сегментах S4 VSD в канале NaV1.4 скелетных мышц человека. Вольт-сенсорный токсин Hm-3 из яда паук Heriaeus melloteei подавляет токи утечки через такие мутантные каналы. Для изучения механизма взаимодействия Hm-3 и канала NaV1.4 мы сосредоточились на исследовании изолированного домена VSD-I с помощью ЯМР-спектроскопии в среде имитирующей мембрану. Модель комплекса Hm-3/VSD-I была построена методом белок-белкового докинга с использованием ограничений ЯМР. Токсин изначально закрепляется на поверхности мембраны, а затем образует комплекс с петлей S3b-S4 VSD-I. Связывание Hm-3 блокирует движение спирали S4 – датчика-потенциала и индуцирует аллостерические изменения, которые препятствуют появлению токов утечки. Наша работа является первым структурным ЯМР-исследованием взаимодействия между вольт-сенсорными токсинами и каналами Nav.

Публикации

  1. Männikkö R, Shenkarev ZO, Thor MG, Berkut AA, Myshkin MY, Paramonov AS, Kulbatskii DS, Kuzmin DA, Castañeda MS, King L, Wilson ER, Lyukmanova EN, Kirpichnikov MP, Schorge S, Bosmans F, Hanna MG, Kullmann DM, Vassilevski AA (2018). Spider toxin inhibits gating pore currents underlying periodic paralysis. Proc Natl Acad Sci U S A 115 (17), 4495–4500

Обнаружено, что секретируемый белок человека SLURP-1, который экспрессируется в эпителиальных клетках и контролирует их пролиферацию и миграцию, подавляет рост раковых клеток эпителиального происхождения.

Воздействие SLURP-1 на раковые клетки характеризуется положительной обратной связью: экзогенный (рекомбинантный) SLURP-1 связывается с никотиновыми ацетилхолиновыми рецепторами α7 типа на поверхности клеток и запускает каскад сигналов, который мгновенно активирует секрецию эндогенного SLURP-1 из внутриклеточных депо, быстро повышая его концентрацию в межклеточном пространстве и усиливая антипролиферативное действие.

Концентрации SLURP-1, подавляющие деление опухолевых клеток, не влияют на рост нормальных клеток.

Ефременко А.В., Шаронов Г.В., Феофанов А.В. (Лаборатория оптической микроскопии и спектроскопии биомолекул), Люкманова Е.Н., Бычков М.Л., Шулепко М.А., Кульбатский Д.С., Долгих Д.А., Кирпичников М.П. (Группа биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов, Отдел биоинженерии), Шенкарев З.О (Группа структурной биологии ионных каналов).

Обнаружено, что секретируемый белок человека SLURP-1, который экспрессируется в эпителиальных клетках и контролирует их пролиферацию и миграцию, подавляет рост раковых клеток эпителиального происхождения. Воздействие SLURP-1 на раковые клетки характеризуется положительной обратной связью: экзогенный (рекомбинантный) SLURP-1 связывается с никотиновыми ацетилхолиновыми рецепторами α7 типа и запускает каскад сигналов, который активирует секрецию эндогенного SLURP-1, быстро повышая его концентрацию в межклеточном пространстве и усиливая антипролиферативное действие.  Концентрации SLURP-1, подавляющие деление опухолевых клеток, не влияют на рост нормальных клеток.

Авторы: Апарин И.О., Проскурин Г.В., Прохоренко И.А., Коршун В.А. (Лаборатория молекулярного дизайна и синтеза), Шенкарев З.О. (Группа структурной биологии ионных каналов), Парамонов А.С. (Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии), Рогожин Е.А. (Лаборатория нейрорецепторов и нейрорегуляторов).

Установлена структура двух компонентов липопептидного антибиотика кристалломицина из образца, полученного 60 лет назад. Установлена идентичность компонентов кристалломицина двум компонентам аспартоцина, структура которых была выяснена недавно. Антибиотик проявляет Ca2+-зависимую активность к грам-положительным бактериям. С помощью ЯМР исследованы конформации кристалломицина 2 в растворе.

В составе пептидного антибиотика INA-5812 обнаружена аминокислота 4-хлор-L-кинуренин, ранее встречавшаяся в природных продуктах лишь однажды. Нами впервые описаны флуоресцентные свойства 4-хлор-L-кинуренина и его использование в качестве донора энергии для возбуждения других флуорофоров.

С использованием различных методов 2D ЯМР установлена структура двух новых макролидных антибиотиков, астолидов А и Б. Молекулы астолидов одновременно содержат в качестве агликонов мембрано-активный полиольный макролид и редокс-активный нафтохиноновый остаток. Наличие гидроксильной группы в положении 18 принципиальным образом меняет спектр биологической активности по сравнению с известными аналогами – возрастает противогрибковая активность и снижается цитотоксичность.

Публикации

  1. Alferova VA, Shuvalov MV, Suchkova TA, Proskurin GV, Aparin IO, Rogozhin EA, Novikov RA, Solyev PN, Chistov AA, Ustinov AV, Tyurin AP, Korshun VA (2018). 4-Chloro-l-kynurenine as fluorescent amino acid in natural peptides. Amino Acids 50 (12), 1697–1705
  2. Alferova VA, Novikov RA, Bychkova OP, Rogozhin EA, Shuvalov MV, Prokhorenko IA, Sadykova VS, Kulko AB, Dezhenkova LG, Stepashkina EA, Efremov MA, Sineva ON, Kudryakova GK, Peregudov AS, Solyev PN, Tkachev YV, Fedorova GB, Terekhova LP, Tyurin AP, Trenin AS, Korshun VA (2018). Astolides A and B, antifungal and cytotoxic naphthoquinone-derived polyol macrolactones from Streptomyces hygroscopicus. Tetrahedron 74 (52), 7442–7449
  3. Jiang ZK, Tuo L, Huang DL, Osterman IA, Tyurin AP, Liu SW, Lukyanov DA, Sergiev PV, Dontsova OA, Korshun VA, Li FN, Sun CH (2018). Diversity, novelty, and antimicrobial activity of endophytic actinobacteria from mangrove plants in Beilun Estuary National Nature Reserve of Guangxi, China. Front Microbiol 9 (MAY), 868
  4. Tyurin AP, Alferova VA, Paramonov AS, Shuvalov MV, Malanicheva IA, Grammatikova NE, Solyev PN, Liu S, Sun C, Prokhorenko IA, Efimenko TA, Terekhova LP, Efremenkova OV, Shenkarev ZO, Korshun VA (2018). Crystallomycin revisited after 60 years: Aspartocins B and C. Medchemcomm 9 (4), 667–675

Токсин паука блокирует аберрантные токи в мутантных ионных каналах

Совместно с: Лаборатория биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов,  Лаборатория молекулярных инструментов для нейробиологии

Токсин из яда паука-бокохода Heriaeus melloteei может стать основой для создания лекарства от гипокалиемического периодического паралича второго типа, надежного лекарства от всех случаев которого не существует. Причиной заболевания служат мутации гена потенциал-чувствительных натриевых каналов NaV1.4, характерных для скелетных мышц. В результате мутаций эти каналы проводят аберрантные токи, мышцы оказываются неспособны отвечать на сигналы нервной системы, и развивается слабость вплоть до паралича. Токсин Hm-3 оказался способным селективно блокировать такие токи, протекающие через потенциал-чувствительных домен I мутантных каналов. Подробнее в пресс-релизе на сайте ИБХ.

Публикации

  1. Männikkö R, Shenkarev ZO, Thor MG, Berkut AA, Myshkin MY, Paramonov AS, Kulbatskii DS, Kuzmin DA, Castañeda MS, King L, Wilson ER, Lyukmanova EN, Kirpichnikov MP, Schorge S, Bosmans F, Hanna MG, Kullmann DM, Vassilevski AA (2018). Spider toxin inhibits gating pore currents underlying periodic paralysis. Proc Natl Acad Sci U S A 115 (17), 4495–4500

Новые антимикробные пептиды из древних морских беспозвоночных

Совместно с: Отдел «Учебно-научный центр»

В рамках работы по изучению антимикробных пептидов (АМП) животных, проводимой в Учебно-научном центре ИБХ РАН, были обнаружены новые защитные катионные пептиды из древних морских беспозвоночных – никомицины-1 и -2 из небольшой Арктической полихеты Nicomache minor и полифемузин III (PM III) из мечехвоста Limulus polyphemus, а также изучены их структурные и биологические свойства. В ходе работы были получены рекомбинантные аналоги природных АМП и изучена их пространственная структура. Никомицины обладают пространственной структурой, включающей амфипатическую N-концевую α-спираль и C-концевую петлю, состоящую из шести аминокислотных остатков и стабилизированную дисульфидной связью. Структура никомицина уникальна среди AMП полихет и сходна со структурой α-спиральных защитных AMП из кожи лягушек, содержащих С-концевой мотив Rana-box, также стабилизированный дисульфидным мостиком. Никомицин-1 проявляет выраженную активность в отношении грамположительных бактерий в субмикромолярных концентрациях. Предполагается, что механизм действия никомицина-1 связан с повреждением клеточной мембраны, а не с ингибированием процесса биосинтеза белка. Структурный анализ последовательности препроникомицинов показывает, что домен BRICHOS может принимать участие в биосинтезе не только β-шпилечных АМП полихет, но и α-спиральных пептидов, а именно, никомицинов. PM III представляет собой β-шпилечный АМП, который способен быстро повышать проницаемость цитоплазматической мембраны клеток лейкемии человека HL-60. Эксперименты с использованием проточной цитометрии с двойным окрашиванием аннексином V-FITC / пропидий йодидом показали, что ингибитор каспазы Z-VAD-FMK практически не влияет на действие пептида PM III. Полученные данные свидетельствуют о том, что PM III нарушает целостность плазматической мембраны и вызывает гибель клеток по механизму, предположительно, не связанному с апоптозом. По сравнению со своими природными изоформами – полифемузинами и тахиплезинами, PM III проявляет аналогичную или более низкую антибактериальную активность, но значительно более высокую цитотоксичность в отношении опухолевых и трансформированных клеточных линий человека в условиях in vitro.

Вторичная структура и динамика потенциалочувствительного домена второй псевдосубъединицы канала Nav1.4 скелетных мышц человека

Совместно с: Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии,  Лаборатория моделирования биомолекулярных систем,  Лаборатория биоинженерии нейромодуляторов и нейрорецепторов

Потенциалозависимые Na+ каналы играют важнейшую роль в функционировании сердечно-сосудистой, мышечной и нервной систем. α-субъединица Na+ канала состоит из ~2000 аминокислотных остатков, что значительно затрудняет структурные исследования полноразмерных каналов. Методом ЯМР-спектроскопии мембраномоделирующем окружении, был исследован изолированный потенциалочувствительный домен (VSD-II) канала Nav1.4 скелетных мышц человека. Вторичная структура VSD-II схожа со структурой бактериальных Na+ каналов. Часть спирали S4 между первым и вторым консервативными остатками Arg, вероятно, имеет конформацию 3/10-спирали. Данные о релаксации ядер 15N выявили характерную подвижность в мкс-мс временном диапазоне для участков VSD-II, участвующих в предполагаемых межспиральных контактах. VSD-II демонстрирует повышенную подвижность в пс-нс временном диапазоне по сравнению с изолированными VSD K+ каналов.

Раскрыт механизм связывания и переноса липидов растительными липид-транспортирующими белками

Совместно с: Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии,  Отдел «Учебно-научный центр»

Новые липид-транспортирующие белки (LTP) чечевицы, гороха и укропа были выделены и охарактеризованы в Учебно-научном центре ранее. В 2017 г. нами показана способность растительных LTP с различной эффективностью связывать и переносить широкий спектр липидных молекул. Установлено, что аффинность LTP по отношению к насыщенным и ненасыщенным жирным кислотам возрастает по мере уменьшения длины ацильных цепей.  Показано, что LTP эффективнее переносят анионный липид DMPG, чем цвиттерионный DMPC. Методами ЯМР-спектроскопии подтверждена более высокая аффинность LTP к анионным липидам и молекулам с небольшим размером гидрофобных цепей. Определена пространственная структура комплекса Lc-LTP2/LPPG. Установлено, что размер внутренней гидрофобной полости LTP увеличивается от 600 до 1000 А3 при связывании с липидами. Ацильные цепи LPPG или DMPG занимают пространство гидрофобной полости LTP, а головки липидов выступают наружу между α–спиральными участками Н1 и Н3. Другой вход в гидрофобную полость Lc-LTP2, ограниченный петлей между α–спиралями H2-H3 и С-концевым участком, играет важную роль во взаимодействии с поверхностью мембраны, участвует в поглощении липидов и определяет селективность LTP по отношению к лиганду. Полученные результаты впервые раскрывают механизм связывания и переноса липидов посредством LTP и углубляют понимание биологической роли растительных LTP.